我校生命科学学院李顺鹏教授课题组最近传出喜讯,其研究小组最新研究成果于5月19日正式在线发表于国际权威杂志Nucleic Acids Research。该杂志是由牛津大学出版社(Oxford University Press)发行并在全世界享有最高盛誉的刊物之一,其2004年的影响因子为7.260。它刊登核酸和核酸代谢以及相互作用有关蛋白质方面的物理、化学、生化和生物领域中领先研究的重要成果。这是我校首次在该杂志上刊发研究成果。
该研究成果以南京农业大学为唯一完成单位,由李顺鹏教授指导的张晓舟博士生等人完成。该研究采用大肠杆菌染色体上编码一种内切核酸酶的基因mazF作为新的反向筛选标记,建立了一种简单方便而高效的枯草杆菌染色体同源重组遗传操作体系。利用该遗传操作体系的同源重组载体系统,可以非常方便而精确地实现枯草杆菌染色体DNA的目标基因的删除和定点突变,外源基因的插入以及染色体DNA大片段的删除等操作。这种载体可以在一个宿主菌中反复使用,因此可以完成复杂的染色体多基因位点的改造,尤其是在代谢工程中有着极为广泛的应用前景。
该研究所建立的方法对宿主菌没有任何特殊要求,因此是一种非常通用的方法,亦可以被用于那些遗传背景不清楚的野生菌株,这打破了以前已有方法的局限。同时,只要有一套可以严格调控的诱导表达系统,本系统亦将适合于其它革兰氏阳性和阴性菌的染色体遗传操作。最新的研究表明,MazF在低等真核生物(酵母)和高等真核生物(小鼠和人细胞)中也是起作用的,这揭示了mazF基因在以上真核生物中作为反向筛选标记的巨大潜力。
美国芽孢杆菌保藏中心主任和匿名审稿人评价该研究成果:采用了一种灵活的方式来完成枯草杆菌染色体的无标记改造;该成果将是枯草杆菌研究领域的一个重要工具。
全文下载地址:http://nar.oxfordjournals.org/cgi/content/full/34/9/e71
该研究成果以南京农业大学为唯一完成单位,由李顺鹏教授指导的张晓舟博士生等人完成。该研究采用大肠杆菌染色体上编码一种内切核酸酶的基因mazF作为新的反向筛选标记,建立了一种简单方便而高效的枯草杆菌染色体同源重组遗传操作体系。利用该遗传操作体系的同源重组载体系统,可以非常方便而精确地实现枯草杆菌染色体DNA的目标基因的删除和定点突变,外源基因的插入以及染色体DNA大片段的删除等操作。这种载体可以在一个宿主菌中反复使用,因此可以完成复杂的染色体多基因位点的改造,尤其是在代谢工程中有着极为广泛的应用前景。
该研究所建立的方法对宿主菌没有任何特殊要求,因此是一种非常通用的方法,亦可以被用于那些遗传背景不清楚的野生菌株,这打破了以前已有方法的局限。同时,只要有一套可以严格调控的诱导表达系统,本系统亦将适合于其它革兰氏阳性和阴性菌的染色体遗传操作。最新的研究表明,MazF在低等真核生物(酵母)和高等真核生物(小鼠和人细胞)中也是起作用的,这揭示了mazF基因在以上真核生物中作为反向筛选标记的巨大潜力。
美国芽孢杆菌保藏中心主任和匿名审稿人评价该研究成果:采用了一种灵活的方式来完成枯草杆菌染色体的无标记改造;该成果将是枯草杆菌研究领域的一个重要工具。
全文下载地址:http://nar.oxfordjournals.org/cgi/content/full/34/9/e71
